由于RNAi實(shí)驗(yàn)技術(shù)的推廣和應(yīng)用，人們對(duì)特定基因“敲除”或“沉默”變得越來越簡(jiǎn)單，研究也越來越多。在體外培養(yǎng)細(xì)胞中進(jìn)行RNAi實(shí)驗(yàn)已經(jīng)比較容易，人們只需要選擇合適的培養(yǎng)細(xì)胞系，用特定的核酸和轉(zhuǎn)染試劑即可完成相應(yīng)的轉(zhuǎn)染。隨著研究的深入，人們需要將研究從經(jīng)過人工改造的細(xì)胞和模擬的簡(jiǎn)單的人工培養(yǎng)環(huán)境，轉(zhuǎn)向自然的細(xì)胞和體內(nèi)自然復(fù)雜的環(huán)境，揭示更符合真實(shí)自然的**和生命秘密，并向應(yīng)用更進(jìn)一步。
但以前動(dòng)物實(shí)驗(yàn)往往讓人望而卻步，主要的原因是沒有簡(jiǎn)單可靠的方法進(jìn)行，花費(fèi)的時(shí)間和周期長(zhǎng)，達(dá)不到預(yù)期的效果。以前人們?nèi)绻朐趧?dòng)物體內(nèi)進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)，主要是通過腺病毒或慢病毒的方法進(jìn)行。病毒感染的方法主要過程是，構(gòu)建相應(yīng)的病毒載體，然后在細(xì)胞中進(jìn)行病毒包裝。通常情況下包裝一次病毒至少幾個(gè)月，花費(fèi)幾萬到十幾萬，如果實(shí)驗(yàn)重復(fù)，這個(gè)時(shí)間和花費(fèi)就更大了。病毒感染的方法，由于是病毒主動(dòng)侵襲，一般認(rèn)為效率高。但在實(shí)際應(yīng)用過程中，由于包裝過程復(fù)雜，任何一個(gè)環(huán)節(jié)出錯(cuò)，都有可能導(dǎo)致包裝失敗或包裝出來的病毒效率低下。此時(shí)，由于環(huán)節(jié)眾多，往往不易查找原因。對(duì)采用病毒包裝進(jìn)行RNAi實(shí)驗(yàn)來說，由于需要選擇具有佳干擾效率的核酸序列，往往需要不斷調(diào)整，如果每次調(diào)整都需要重新包裝病毒來說，那么效率就太低下了，同時(shí)花費(fèi)也非常大。而且，病毒還存在對(duì)研究者和環(huán)境的生物**的問題。
那么有沒有像體外細(xì)胞轉(zhuǎn)染一樣簡(jiǎn)單易用的方法呢，只需要花幾百元合成小片斷RNA，然后用轉(zhuǎn)染試劑就完成轉(zhuǎn)染。很多研究者已經(jīng)進(jìn)行過嘗試，他們發(fā)現(xiàn)，如果簡(jiǎn)單用體外轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行轉(zhuǎn)染，會(huì)面臨幾個(gè)問題。首先是體外培養(yǎng)基和動(dòng)物體內(nèi)的體液系統(tǒng)是完全不同的，一些適合體外轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)染試劑，如脂質(zhì)系統(tǒng)，是很容易被體內(nèi)的體液系統(tǒng)所破壞和****的。其次是一些轉(zhuǎn)染試劑在體外進(jìn)行時(shí)，毒性已比較明顯，如果進(jìn)行體內(nèi)轉(zhuǎn)染，那么動(dòng)物發(fā)生炎癥反應(yīng)的比例也會(huì)很高，這樣不僅不能產(chǎn)生良好的轉(zhuǎn)染效果，而且干擾了實(shí)驗(yàn)效果，甚至導(dǎo)致動(dòng)物的死亡。所以，一些普通的體外轉(zhuǎn)染試劑是不支持進(jìn)行體內(nèi)轉(zhuǎn)染的。
如果需要在動(dòng)物體內(nèi)采用轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行轉(zhuǎn)染，這要求：1.轉(zhuǎn)染試劑能耐受體內(nèi)復(fù)雜的環(huán)境，不會(huì)被體內(nèi)**系統(tǒng)識(shí)別**，產(chǎn)生**反應(yīng)。2.轉(zhuǎn)染試劑效率要高，毒性要低，眾所周知，原代細(xì)胞比傳代細(xì)胞要難轉(zhuǎn)染得多，而體內(nèi)轉(zhuǎn)染又要比體外轉(zhuǎn)染要難。所以轉(zhuǎn)染的效率一定要高，同時(shí)，毒性要低，這樣才能產(chǎn)生顯著的轉(zhuǎn)染效果，以利于實(shí)驗(yàn)觀察。
英格恩生物近期推出的動(dòng)物體內(nèi)專用轉(zhuǎn)染試劑Entranster?-in vivo，非脂質(zhì)體，采用納米技術(shù)合成，能耐受體內(nèi)復(fù)雜的環(huán)境，不產(chǎn)生**反應(yīng)。而且轉(zhuǎn)染效率高，方法簡(jiǎn)單。只需要將核酸和轉(zhuǎn)染試劑稀釋混合，無需過濾，即可直接注射動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。Entranster?-in vivo的價(jià)格也非常合適，只相當(dāng)普通的體外轉(zhuǎn)染試劑的價(jià)格。對(duì)需要?jiǎng)游飳?shí)驗(yàn)，經(jīng)費(fèi)、時(shí)間和實(shí)驗(yàn)條件有限的實(shí)驗(yàn)室來說，無疑是好消息。
Entranster?-in vivo動(dòng)物體外轉(zhuǎn)染試劑雖然推出時(shí)間不長(zhǎng)，但由于其方法、價(jià)格和效果上的突出優(yōu)點(diǎn)，已被許多實(shí)驗(yàn)室采用，并有相當(dāng)?shù)膽?yīng)用文獻(xiàn)發(fā)表。
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