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德國美天旎MACSelect?——轉染后的明智之選

光陰荏苒,歲月如梭,做實驗的時光總是過得特別快。轉染后的細胞篩選,動輒幾個星期,多則數(shù)月,真是急得人直跳腳。MACSelect的登場,讓一切問題都迎刃而解了。

德國美天旎公司推出的MACSelect?系統(tǒng),是一種轉染細胞分選系統(tǒng),可以磁性富集已轉染的哺乳動物細胞。無論是原代細胞或難轉的細胞系,也不論是貼壁或懸浮細胞,在常規(guī)轉染后都能分選。高比例的陽性細胞和小的非轉染細胞的背景,增加了下游的分析顯著性和可靠性。

無論你進行功能基因分析、藥篩、報告基因檢測,還是RNAi,轉染都是必不可少的步驟。那么,試試MACSelect吧,3小時篩選出轉染細胞,花少的時間獲得大的結果!

與耗時的***篩選相比,使用MACSelect技術,僅需3小時就能挑選出轉染陽性細胞。重復的MACSelect挑選,可得到穩(wěn)定表達的細胞系。溫柔的MACS磁珠極小,直徑僅有50 nm,對細胞無毒性,不影響細胞功能,還能降解。篩選出的細胞能直接進行功能研究或細胞培養(yǎng)。同時,你也無需改變轉染方法。只要加入MACSelect的篩選標志,任何轉染方法:電轉、磷酸鈣、脂質體或核轉染都OK。

MACSelect是一個聰明的系統(tǒng)。選擇標志物共表達在細胞表面,已轉染的細胞可通過磁性標記從未轉染的細胞中分選出來。所有的pMACS載體編碼的表面標志物都刪除了胞內domain。使用pMACS載體和表達載體的共轉是簡單的 MACSelect系統(tǒng)使用方法。當然,也可以把基因克隆到pMACS載體進行單轉。

美天旎提供的篩選標志有三種:CD4、H2-KK、LNGFR。MACSelect 4 系統(tǒng)使用修改的人CD4分子作為選擇標志物。它適用于CD4陰性細胞系。MACSelect KK系統(tǒng)使用修改的小鼠MHC I分子H-2KK作為選擇標志物。僅有極少的鼠系細胞表達H-2KK,因而其可用于幾乎任何哺乳動物細胞。MACSelect LNGFR系統(tǒng)使用的人低親和度神經(jīng)生長因子受體(LNGFR)分子經(jīng)過修改。表達LNGFR分子的細胞有:**和外周神經(jīng)系統(tǒng)細胞,骨髓成纖維細胞,濾泡樹突狀細胞和一些間充質細胞。因此,載體也有常規(guī)和雙順反子兩類。

幾個小時后,轉染后的細胞就被MACSelect磁珠標記上,并通過磁性作用在MACS的柱上進行分離。如果是手動操作,MS或LS柱加MACS分離器就行,如果是高通量的分析,autoMACS將是個不錯的選擇。

德國美天旎MACSelect?——轉染后的明智之選
德國美天旎MACSelect?——轉染后的明智之選

MACSelect的步驟

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